2021年8月15日，某大学的研究团队 咨询检测多糖分析。

客户背景

某大学的研究团队，自己研发提取一种糖类混合物，需要研发新药物做前期测试。

样品名称

糖类提取物

解决方案

一、单糖组成测定实验

1.实验目的

使用离子色谱仪测定单糖组成。

2.实验原理

基于糖类分子具有电化学活性及在强碱溶液中呈离子化状态。糖类化合物为pKa＞11的弱酸，在高pH值得淋洗液中，它们会部分或全部以阴离子形式存在，根据不同糖类化合物的pKa的差异引起的离子交换作用的差异以及某些糖类与阴离子交换树脂之间的疏水性作用的不同，实现糖类化合物的高效阴离子交换分离，然后对糖分子结构中的羟基在金电极表面发生氧化反应产生的电流实现检测。

3.实验材料

3.1仪器

3.2试剂

3.3标准品

4.实验方法

4.1试剂配制

4.2标准溶液的配制和计算方法

取16种单糖标准品（岩藻糖、鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、甘露糖、果糖、核糖、半乳糖醛酸、葡萄糖醛酸、氨基半乳糖盐酸盐、盐酸氨基葡萄糖、N-乙酰-D氨基葡萄糖、古罗糖醛酸、甘露糖醛酸）配成标准母液溶液。

取各单糖标准溶液精密配置浓度标准品作为混标。根据绝对定量方法，测定不同单糖质量，根据单糖摩尔质量计算出摩尔比。

4.3样品准备

精密称量10mg样品置于安瓿瓶中，加入3M TFA 10ml，120℃水解3h。准确吸取酸水解溶液转移至管中氮吹吹干，加入10ml水涡旋混匀，吸取100uL加入900uL去离子水，12000rpm离心5min。取上清进IC分析。

4.4色谱方法

色谱柱：DionexCarbopacTMPA20 (3*150) ；流动相：A:H2O; B:15mMNaOHC: 15mMNaOH&100mM NaOAC；流速：0.3ml/min；进样量：5?L；柱温：30 ?C；检测器：电化学检测器。

4.5标准品序列

5.实验结果

混标：溶剂峰：2.0min为氢氧化钠的峰，40min乙酸钠的峰。